生物工程学报

作者：何丽，陈丽丹，杨欢，郭莹坚，李亚婷，张海燕

单位：1.广州中医药大学 研究生院，广东 广州 510006;2.中国人民解放军南部战区总医院，广东 广州 510010

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;核酸检测;快速检测;多重检测;聚合酶链反应;耐药菌筛查

基金：中国人民解放军南部战区总医院基础医学研究重点项目(2023NZB004)；广州市科技计划(2025A03J3275)

为建立一种快速、准确的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)核酸即时检测方法，本研究首先针对16S rRNA、nuc和mecA基因设计特异性引物与荧光探针；以MRSA标准菌株制备梯度核酸标准品，优化qPCR体系并测序验证，完成方法构建。随后系统评估该体系的灵敏度、线性范围、重复性、特异性及抗干扰性能。最后，将优化后的方法应用于临床样本，并以临床实验室常用的鉴定方法(质谱法)为参比方法，验证其实用价值。本研究建立的MRSA核酸快速检测体系，可在30 min内完成对MRSA核酸的检测，对16S rRNA、nuc和mecA基因的灵敏度分别为1.0×10²、1.0×10²、1.0×10³ CFU/mL；线性范围分别为1.0×10²?1.0×10⁹、1.0×10²?1.0×10⁹、1.0×10³?1.0×10⁹ CFU/mL；批内和批间的变异系数均小于5%；与多种病原体之间无交叉反应；2 g/L的血红蛋白和100 μg /mL头孢曲松钠对检测无干扰；与质谱法相比，具有较好的一致性，灵敏度和特异性较高。结果表明，本研究构建的MRSA核酸快速检测方法兼具高灵敏度与操作简便性，为病原微生物核酸即时检测提供了新策略，可作为临床微生物快速筛查的可靠技术选项。

来源：2026年第2期

《生物工程学报》期刊编辑部

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