生物工程学报

作者：肖文慧

单位：1.浙江海洋大学 海洋科学与技术学院 海洋生物蛋白质工程实验室，浙江 舟山 316022;2.浙江海洋大学 食品与药学学院 浙江省海洋生物医药制品工程技术研究中心，浙江 舟山 316022

关键词：厚壳贻贝;贻贝防御素;重组表达;抗菌肽;毕赤酵母

基金：国家自然科学基金(32271580, 42020104009)；浙江省省属高校科研院所基本科研业务费(JX6311101923)

贻贝含有丰富的抗菌肽(antimicrobial peptides, AMPs)，其在贻贝的先天免疫过程中发挥关键作用。贻贝抗菌肽序列较短，含多个二硫键且碱性氨基酸含量高，因此，其在原核系统(如大肠杆菌)中的功能性异源表达仍是一种挑战。为构建贻贝抗菌肽的真核重组表达体系，获得重组贻贝抗菌肽，本研究利用真核宿主毕赤酵母(Pichia pastoris)重组表达具有抑菌功能的贻贝抗菌肽myticofensin-B1，该新型防御素样抗菌肽此前已在厚壳贻贝(Mytilus coruscus)中得以鉴定。编码myticofensin-B1成熟肽段(65个氨基酸，含6个保守半胱氨酸)的基因序列经密码子优化后，克隆至pPICZαA载体，并转化至毕赤酵母GS115菌株中实现异源表达。通过液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)证实了重组肽的序列准确性和完整性；重组肽的分子量为8 849.9 Da，与理论预测值一致。功能验证实验表明，重组myticofensin-B1具有广谱抗菌活性，对革兰氏阴性菌表现出相对更强的抑制作用。扫描电子显微镜观察发现，重组myticofensin-B1对不同细菌具有不同的作用效果。此外，重组myticofensin-B1对绵羊红细胞的溶血活性极低，但对人A549肺癌细胞表现出毒性。本研究建立了基于毕赤酵母的贻贝抗菌肽重组表达平台，表达的重组myticofensin-B1具备作为抗感染治疗药物的潜力。

来源：2026年第2期

《生物工程学报》期刊编辑部

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