生物工程学报

作者：刘永圆，郭明雨，陶伟，李瑜琪，马月欣，吴传超，Elvis Kwame Adinkra，刘艳，陈宇

单位：安徽工程大学 生物与食品工程学院，安徽 芜湖 241000

关键词：FNIII8-10;毕赤酵母;信号肽;发酵优化;代谢调控;高密度发酵

基金：国家自然科学基金(32372295)；芜湖市科技局重点研发与成果转化项目(2023yf125)；安徽省高校自然科学重点项目(2023AH050938)

纤连蛋白(fibronectin, FN) III型结构域的8-10重复序列(FNIII8-10)具备多个整合素结合位点，是介导细胞黏附的核心模块，目前仅在原核微生物中表达。本研究旨在构建高效表达重组FNIII8-10的毕赤酵母表达体系，采用毕赤酵母系统成功表达重组FNIII8-10，但存在分泌效率低的问题，通过信号肽理性设计与发酵工艺调控相结合的策略显著提高了其分泌表达效率。首先，筛选了多个信号肽，发现α-factor信号肽表达效率最高；随后，对其疏水核心区进行定点突变，获得高效突变体α-V50A，使蛋白表达量提升44.8%。通过响应面法优化发酵条件，发现最佳发酵条件为发酵117.46 h、pH 6.91、甲醇添加量1.91%；同时，以山梨醇作为辅助碳源，以缓解甲醇胁迫，重组FNIII8-10产量达到65.49 mg/L。最终通过高密度细胞发酵，使其产量达到532.82 mg/L，比摇瓶最高产量提升了7倍。本研究为FNIII8-10重组蛋白的工业规模化生产提供了技术基础。

来源：2026年第3期

《生物工程学报》期刊编辑部

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