国内刊号:11-1998/Q
国际刊号:1000-3061
发布日期:
作者:宋云海,杨凤玉,王守钢,饶志明,徐美娟
单位:江南大学 生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122
关键词:亚精胺;S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶;全细胞催化;ATP再生;大肠杆菌
基金:国家重点研发计划(2023YFD1300700);国家自然科学基金(32270036);中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP221012, JUSRP622022)
亚精胺是一种天然多胺,具有自噬诱导作用,能延长寿命、抑制肿瘤、保护心血管、调节神经及抗炎,在农业、工业和医药健康领域具有重要应用价值。本研究聚焦于利用微生物法合成亚精胺,通过追溯亚精胺前体物质的合成途径,过表达了前体物质合成的关键酶,在体外多酶级联条件下实现了以氨基酸为底物合成亚精胺,大大降低了生产成本。基于进化树挖掘筛选到酶活较高的枯草芽孢杆菌来源的S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶,进一步通过理性设计对该酶进行定向进化改造,最终获得酶活性较野生型提高2.68倍的突变体。之后通过对比确认了全细胞催化合成亚精胺的优异性,并通过优化基因的串联顺序,引入ATP再生系统,实现了亚精胺的持续高效合成。在此基础上系统优化了反应体系,包括菌体量、底物浓度、反应温度、pH、金属离子,在最优反应条件下,重组大肠杆菌EC12在5 L反应器转化20 h,亚精胺最高产量达到17.83 g/L。本研究构建的重组大肠杆菌具有应用于工业生产亚精胺的潜力,为亚精胺的绿色高效合成奠定了理论和应用基础。
来源:2026年第3期
《生物工程学报》期刊编辑部