生物工程学报

作者：赵永聪，马中元，张中旺，吕建亮，张莉萍，于瑞明，兰喜，郭慧琛，潘丽，刘新生

单位：1中国农业科学院兰州兽医研究所 兰州大学 动物医学与生物安全学院 动物疫病防控全国重点实验室，甘肃 兰州 730046;2甘肃省病原生物学基础学科研究中心，甘肃 兰州 730046;3甘肃农业大学 生命科学技术学院，甘肃 兰州 730070

关键词：猪瘟病毒;E2蛋白;乳酸乳球菌;黏膜免疫;体液免疫

基金：国家生猪产业技术体系(CARS-35)；甘肃省科技计划(24CXNA055)；国家生猪技术创新中心(NCTIP-XD/C 03)

猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)主要通过呼吸道和消化道感染猪，给全球养猪业造成了巨大的经济损失。sIgA介导的黏膜免疫反应对于抵御CSFV早期入侵至关重要，本研究旨在利用乳酸乳球菌为载体研制口服疫苗，通过诱导黏膜免疫产生sIgA，从而阻断CSFV的早期入侵，为适应现代化猪场的大规模、无应激免疫提供新的技术手段。首先通过荧光素酶活体成像技术和粪便菌落计数评估乳酸乳球菌NZ9000在小鼠体内的定植能力，随后利用同源重组技术构建菌体表面展示CSFV E2蛋白的重组乳酸乳球菌NZ9000/pNZ8148- pgsA- E2以及胞内表达E2蛋白的重组乳酸乳球菌NZ9000/pNZ8148- E2。重组菌株经免疫印迹和间接免疫荧光鉴定目的蛋白E2的表达，随后评价重组菌株在小鼠体内的免疫原性。结果表明，乳酸乳球菌NZ9000可在小鼠体内短暂定植。NZ9000/pNZ8148- pgsA- E2与NZ9000/pNZ8148- E2分别实现了目的蛋白的表面展示与胞内表达。经灌胃免疫小鼠后，2种重组菌株均能有效诱导小鼠产生特异性免疫应答；表面展示型重组菌在诱导Th1型细胞因子分泌及CD4? T细胞活化方面比胞内表达型重组菌更具优势。本研究成功构建了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组乳酸乳球菌，为开发防治猪瘟的黏膜免疫疫苗提供了实验依据。

来源：2026年第4期

《生物工程学报》期刊编辑部

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