国内刊号:11-1998/Q
国际刊号:1000-3061
发布日期:
作者:成俊丽,韩俊,闫俊蓉,朱芷葳,李鹏飞
单位:1山西农业大学 动物科学学院,山西 太谷 030801;2山西农业大学 生命科学学院,山西 太谷 030801
关键词:牛;卵泡发育;颗粒细胞;HSD3B7;CCND2;Bim;Caspase-3;CYP19A1
基金:山西省基础研究计划(202303021221094, 202403021222122, 202503021211173);山西省现代农业产业技术体系建设专项资金(2025CYJSTX13)
本研究旨在探究3β-羟基-Δ5-C27-类固醇氧化还原酶(3β-hydroxy-Δ5-C27-steroid oxidoreductase, HSD3B7)对牛卵泡发育的调节作用及其机制。构建敲降和过表达HSD3B7基因的牛原代颗粒细胞(granulosa cells, GCs),用细胞计数试剂-8 (cell counting kit-8, CCK-8)法检测GCs增殖效率,用Annexin V-EGFP/PI双染法检测GCs凋亡水平,用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)技术检测培养液中雌二醇(estradiol, E2)和胞内2-甲氧基雌酮的浓度,用实时荧光定量PCR (real-time quantitative-polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术检测CCND2、Bim、Caspase-3、CYP19A1、STAR的相对表达水平,用Western blotting技术检测相关基因蛋白水平的表达情况。结果显示,HSD3B7敲降后降低了牛卵泡原代GCs增殖效率和CCND2蛋白的表达水平;促进了GCs凋亡和Bim蛋白、Caspase-3蛋白的表达;减少E2的分泌量和CYP19A1蛋白、STAR蛋白的表达量;增加E2主要代谢物2-甲氧基雌酮的浓度。HSD3B7过表达后取得相反结果。本研究结果表明,HSD3B7通过促进牛GCs增殖和E2分泌、抑制GCs凋亡,正向调控牛卵泡发育进程。研究结果为深入解析牛卵泡发育的分子调控网络提供了新的理论依据,也为提高牛繁殖效率的相关研究和实践应用奠定了基础。
来源:2026年第4期
《生物工程学报》期刊编辑部