国内刊号:11-1998/Q
国际刊号:1000-3061
发布日期:
作者:黄紫贝,苏思元,王海燕,刘文博
单位:1扬州大学 兽医学院,江苏 扬州 225009;2江苏农牧科技职业学院,江苏 泰州 225300;3江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009
关键词:产气荚膜梭菌;毒素表达;单克隆抗体;重组蛋白;早期诊断
基金:江苏省农业科技自主创新项目(CX(20)2012-1);江苏省优势学科第四期(2021)
本研究旨在构建产气荚膜梭菌6种主要毒素的原核表达系统,制备特异性单克隆抗体,为相关毒素检测及疾病早期诊断提供可靠的实验依据。克隆产气荚膜梭菌6种主要毒素基因,构建重组融合蛋白表达载体,进行原核表达及纯化。以纯化的重组蛋白作为免疫原,免疫动物后多轮筛选获得单克隆抗体杂交瘤细胞株。Western blotting验证抗体对重组蛋白及天然毒素的特异性识别能力。成功构建并表达了6种主要毒素的重组融合蛋白,获得3株功能稳定的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为3B10 (针对CPA毒素)、10E9 (针对ETX毒素)及5F9 (针对NetB毒素)。Western blotting结果表明,所制备抗体能够特异性识别重组蛋白及天然毒素,且免疫反应性良好。本研究成功表达了主要毒素并制备了针对3种毒素的特异性单克隆抗体,为相关毒素的快速检测及山羊产气荚膜梭菌病的早期诊断研究提供了生物材料,具有重要的潜在应用价值。
来源:2026年第4期
《生物工程学报》期刊编辑部